生物制品是制药工业的一部分，对生产厂房有很高的洁净要求，尤其是活jun、活疫苗的生产中，经常受到不同程度的污染，因此，不仅需要重视洁净室的建立，更要重视质量控制方法及标准。

朝鲜战争中，美国发现大量电子仪器失灵，后找到了主要原因，是灰尘在作怪，促成了洁 净技术的起步。1961年，诞生了世界上早的洁净室标准，1966年，颁布了修订后209A， 时至1992年，建立了迄今被广泛采用的209E。上为了加强药品、生物制品质量管理规范 (GMP)，把洁净室定为的生产硬件之一。GMP对厂房、设备等，明确规定了相应的洁净要 求，并制订了有关标准。

1　洁净室的污染源

洁净室污染源按性质可分物理、化学、生物等。直径在0.001-1000μm的固态、液态或二者的混合物质，包括生物粒子和非生物粒子，鸿运国际称为悬浮粒子。微生物一般以无生命的粒子作载体而悬浮，以气溶胶形式存在于空气中，1μm以下者永外悬浮，10μm以上者会逐渐沉下来而形成菌尘。洁净室污染可分为外部污染和内部污染。外部污染指大气尘污染，可以通过光电法测得。内部污染，是由人和有关的物品、设备 等引起的。人是洁净室大的污染源，占90%左右。人和环境造成了洁净室的污染，所以在洁净室中，人的数量和活动应有特别严格的限制。　　

2　洁净室质控标准

表1　世界主要国家洁净室标准(洁净度)

洁净室是指空气洁净度达到规定要求的可供人类工作的场所 ，其功能是控制微粒的污染 。一般按用途可分为：1.工业洁净室，以无生命的微粒为控制对象;2.生物洁净室，主要控制微生物对工作对象的污染。

3　洁净室质控的检测方法及讨论[8]

3.1　尘埃粒子　由于空气中存在大量尘埃粒子，而微生物大多依附于这些尘埃粒子随空气流动造成污染。制 药工业用多种方法获得无菌状态，过滤法以其捕集率高，又经济而被广泛使用。其中，特别应该提到的是采用了HEPA(High Eicienoy Particulate Air)过滤器，对0.3μm以上空气粒子捕集率高达99.97%以上，除滤过病du外，空气中所有微生物颗粒可被滤除。因此， 正常洁净室是无菌的，但是，由于人、物、环境等污染因素，洁净室往往受到不同程度 污染。因此，鸿运国际多采用激光尘埃粒子计数且进行监控。标准见表2。

表2　外有关悬浮粒子的测定标准(尘粒数/m3)

3.2　空气微生物　空气中活微生物大多依附尘埃粒子而形成生物活性粒子。应用细菌采样器抽取一定量的空气 使其滞留在培养基上，经过培养计数菌落数。20世纪30年代，英国研制porton液体采样器，美 国研制了AGI液体采样器。1941年，Bourdion使用裂缝式采样器，成为空气微生物采样测定的开端。1956年，报道了六级筛孔撞击式采样器，1958年A.A.Andersn对其加以改进并 定型生产，称为安德森(Anderson)空气微生物采样器（苏州宏瑞FSC-A6)。它由顶罩、6节筛板、3个弹簧及抽气 孔和动力装置构成。由于它采集粒谱广 、效率高、生物失活率低等原因而广泛使用至今。空气微生物采样器一般分为七大类：液体式、固体式、沉降式、离心式、光散射式和大容量式。本文将对离心式空气微生物采样器(R CS)作详细讨论。空气微生物测试标准见表3。

表3　外有关空气微生物的测定标准(CFU/m3)

3.3　表面微生物　为了检测洁净室中墙壁、地板、仪器表面、桌面、门把等带菌情况，通常选用接触压印法(Cortact)和棉拭法(Swabbing)等方法。需要时 ，还可与过滤装置相结合来完成棉拭采样。1941年，Walter和Hvcker报道了COntact琼脂平板方法，以后，Angelotti和Fotert等作了进一步的工作。带菌状况都有要求，欧共体GMP( 草案)规定，100级：平均菌落数不可过5 个;1000级：25个;100000级：50个。表面微生物的检测，越来越受到人们的重视。

3.4　关于沉降平皿(Settle plate)　1881年Kock创立。依靠空气中的粒子自然沉降于琼脂平板上的这种采集方法，由于粒子沉降 的速率很慢，如需采集到有效数量的粒子，就需暴露很长时间。但因空气中的致bing菌数量是很少的，金黄色菌菌球jun在医院病房空气中平均每140升才有一个活菌粒子，为了弥补这个缺陷，曾采用直径为14公分的大平皿，以增加琼脂的暴lu面积。Harding和Williams还曾用 一种多层平板的方法来进一步暴露面积，每层放一个14公分直径的平板，但结果不堪满意。

由于洁净室已滤除了大部分大颗粒，一般用此法是无意义的。但是，人为、环境和洁净装置 故障等原因引起的较大颗粒污染以及沉降平板采样洁的简便，可作为日常监测洁净室水平的 一种参考方法。

3.5　关于RCS[9]　离心式空气采样器被介绍作为一种在医院使用的检 测空气微生物的仪器，由于它轻便，无噪音而广泛使用，并扩展到制药工业等领域。RCS通 过离心收集颗粒，为制药工业所接受，因为它似乎符合FDA所描述的“Active”采样仪器。Gre-schel等认为它相当有效，Macher等则持反对意见。多年来，许多者了带菌颗粒的大小，结论是：5-15μm，中等粒是13μm，而4μm以下很少。这些结果是从医院、手shu室、办公室、实验室和制药无菌室所获得。他们认为，如果颗粒大小是已知的，RCS可定 量测定细jun浓度，但是，目前这些颗粒大小是未知的，故不能把它视为定量采样器，只能归于沉降平皿一样的类型。